Wie Kann Ich Das Booten Von Vista Basic Service Pack 2 Reparieren
February 24, 2022
Es lohnt sich, diese Ideen zur Fehlerbehebung zu prüfen, wenn Sie beim Herunterladen von vista Basic Service Pack 2 auf Ihren individuellen Computer einen exklusiven Fehler erhalten.
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Benutzer von Windows Vista können außerdem Windows Update ausprobieren, um ihren Computer auf den neuesten verfügbaren Dienst zu aktualisieren, nämlich das Service Pack (SP2). “
Aufgabe: Genomische DNA in RNA.Problem: Degradierte RNA/schlechte Integrität.Problem: Inhibitoren wo RNA.Problem: geringe RNA-Ausbeute.
In der Vergangenheit scheint die RNA-Isolierung eine der schwierigsten Strategien gewesen zu sein. Fast jeder, der welche Technik beherrscht, hat seine eigenen Tipps und Tricks, um erfolgreich intakte RNA in seinen Proben nachzuweisen. Obwohl RNA möglicherweise etwas unvorhersehbar bleiben könnte, weil sie ohne Frage von Natur aus labil ist, werden einige häufige Probleme sicherlich gelöst werden.
1. Problem: genomische DNA in nur RNA
RNA eluiert von genomischer DNA, die durch Überlagerung von hochmolekularen überschüssigen Fettverbindungen beobachtet wird, oder erscheint in RT-Gelkontrollen klar, wenn sie durch PCR amplifiziert wird.
Grund: Egal welches System Sie verwenden, um RNA auf große Entfernung zu lokalisieren, DNA-Spuren sind wichtig. Dies gilt für Trisol-Artikel (Phenol) und Quarz-Zentrifugalluftfilter. Könnte dies mit freundlicher Genehmigung verursacht werden durch – Scherverlust von genomischer DNA in einem kleinen Stadium der Homogenisierung? Bei der Verwendung jeder Phenolmethode ist der pH-Wert eines bestimmten Phenols kritisch (es muss etwas saurer sein) und die Fähigkeit, nur die neue wässrige Phase zu pipettieren, kann zu mehr oder weniger DNA-Kontamination führen.
Nein. Windows 8 besteht aus zwei Service Packs. Vista schließt mit Service Pack ab.
Lösung: Die genomische DNA sollte gut homogenisiert werden und es sollte eine neue Methode verwendet werden, die die DNA ausreichend aufbricht, so dass sich die Proben während der Homogenisierung dennoch erhitzen die Proben irgendwie abzukühlen, da ein Bereich von Guanidin eine leichte Ausfällung verursacht, die mit dem verfügbaren Salz verbunden ist. Daher müssen Sie die Zeit Homogenisierung bestehend aus Kühlzeit auf die Temperatur in Bezug auf das Wohnzimmer abgleichen.
Der beste Weg, einen Teil der genomischen DNA zu entfernen, kann die Verwendung einer DNase-Behandlung sein, wie z.B. das RTS DNase™ Teeth Whitening Kit, das eine hochgradig einsatzbereite und räumlich stabile Substanz enthält DNase, die Typ-d-DNA-Verunreinigungen effizient entfernt. Nachdem die DNA entfernt wurde, wird dieser Kleber verwendet, um das DNase-Enzym ohne Hitze oder EDTA zu entfernen. Diese Art von Kits wird hauptsächlich für Proben erwähnt, die reich an verspäteter gDNA sind (z.B. Milzgewebe), Proben, die bereits vor der Verarbeitung gereinigt wurden, DNA, und zusätzlich eine kleine Probe zur Verarbeitung gewünscht wird. Säulenmethoden können problemlos für Proben mit geringer genomischer DNA-Kontamination verwendet werden.
2. Problem: RNA-Abbau/schlechte Integrität
Beschichtete rRNA-Geräusche erscheinen durch das Gel, vielleicht ist Spur 18 einfach intensiver als Spur 28. Sie können eine massive 18 bevorstehende Spitze auf dem Agilent Bioanalyzer sehen.
Grund: In einem bestimmten Stadium während der Verarbeitung trat eine Verschlechterung auf. Dies kann problematisch zu lokalisieren sein. Er kann eine vollständige Position bei der Speicherung der Sammlung und/oder eventueller Zugänglichkeit haben. Es kann auch darauf hinweisen, dass diese Post-Isolation stattgefunden hat.
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Entscheidung. Wenn während der Lagerung ein neues Problem auftritt, frieren Sie die eigentliche Probe sofort nach der Entnahme ein. Stoffstickstoff verwenden oder bei -80°C lagern. Für Gewebe verwenden Tiere RNALater und werden zweifellos bei -20°C gelagert.
Wenn Sie während des Extraktionsprozesses Krisen erleben, begraben Sie Beta-Mercaptoethanol (BME) in einer Lyse-Filmleinwand. Verwenden Sie 10 µl 14,3 M BME pro 1 ml, zum Beispiel Lysepuffer. BME tötet RNase und stabilisiert das Probenextraktionsprogramm.
Wenn die Probe zur Entnahme aus dem Gefrierschrank kommt und nicht in der Additivlösung enthalten ist, lassen Sie sie nicht auftauen. Homogenisieren Sie das Programm in den meisten Fällen, in denen BME vorhanden ist, schnell. Achte darauf, dass keine Stoffreste zurückbleiben. Es muss geleckt werden.
Der Abbau von RNase kann auch nach der Isolierung erfolgen. Stellen Sie sicher, dass das gefilterte Wasser, das zum eigentlichen Eluieren oder Resuspendieren der Tabletten verwendet wird, keine RNase enthält. Viele Kits enthalten Wasser für die RNA-Arbeit, das Sie und Ihre Familie mit DEPC behandeln oder auf andere Weise gründlich auffrischen können. Lesen Sie hier mehr über die Fiktion hinter DEPC- und RNase-Sitzungen
Außerdem finden Sie den Artikel im Bereich der 10 Wege zur Eliminierung von RNase im Allgemeinen hilfreich.
3. Problem: Inhibitoren in RNA
RNA ist ungewöhnlich niedrig 260/230 (unter 1,0) wahrscheinlich sogar 260/280 oder funktioniert kaum in der reversen Transkription.
Die häufigste Ursache für niedrige RNA-Gehalte ist eine Säulenüberlastung, die zu einer Säulenverstopfung oder einer effizienten RNA-Bindung führen kann. Methoden, die die Viskosität reduzieren, wie Verdünnung durch Lyse, hohe Uhrwerksbelastung und Zentrifugation, werden wahrscheinlich die RNA-Ausbeute erfolgreich erhöhen.
Grund: Ein einfacher 260/230-Wert im RNA-Präparat deutet eigentlich nur darauf hin, dass die Probe das neue Guanidinsalz oder typische Inhibitoren (wie etwa Huminsäuren bzw absolut Polysaccharide, wenn sich die Probe in einer bestimmten Umgebung befindet). Guanidinsalz wird beim Trizol und in Kieselsäurezubereitungen verwendet. Diese Salze inaktivieren RNasen, hemmen aber auch Proteine wie RT-Verdauungsvitamine, wenn sie in der endgültigen RNA vorhanden sind. Ein niedriger Wert von 260/280 weist auf eine Proteinkontamination hin.
EINLEITUNG. Service Pack 2 (SP2) in Windows Vista und Windows Server 2008 unterstützt großartige neue Gerätetypen und neue Hardwaremethoden. Dieses Softwarepaket enthält alle aktuellen Updates, die nach SP1 verfügbar sind, und verkürzt die Bereitstellung für Verbraucher, Entwickler und IT-Experten.
Entscheidung. Bei niedrigen 260/230-Messwerten besteht der spezifische neue beste Ansatz darin, die RNA-Probe gründlicher zu reinigen. Wenn das Trizol ausgefallen ist, entsalzen Sie es jetzt mit Ethanol in der speziellen Wäsche. Für Kieselsäurepräparate müssen relativ wenige weitere Tücher in 70-80 % Ethanol für die Seashore-Säule gereinigt werden. Für bereits gespültes Geschirr, das nicht nur erfrischend ist, versuchen Sie die RNA-Entsalzung bei der Ethanolfällung.
Bei anderen hemmenden Verbindungen wie Huminsäure und Polysacchariden ist es notwendig, die Säule erneut zu reinigen und vor dem Eluieren gründlich zu waschen. Einige dieser Verbindungen können nicht intern (oder RNA-DNA) über herkömmliche Spitzen entfernt werden, da sie den Nukleinsäuren sehr ähnlich sind, um dies für Sie zu ermöglichen. Denken Sie in dieser Schutzhülle daran, den Inhibitor aus den umgebenden Proben zu entfernen.
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